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D300S는 지난 2007년 출시된 D300의 업그레이드 모델로 기존 D300의 우수한 성능을 계승하면서 동영상 기능을 추가하고, 고속 연사촬영 성능을 강화한 니콘 DX 포맷의 플래그십 DSLR 카메라다. D300S는 동영상 촬영 기능인 'D Movie(디무비)'를 탑재해 HD급의 고화질 동영상을 촬영할 수 있다. 특히 기존 동영상 촬영이 가능했던 니콘의 D90, D5000과 달리 외부 스테레오 마이크를 지원하고, 촬영한 영상의 시작과 끝을 설정할 수 있는 편집 기능을 내장하고 있다. 또한 고속 연사촬영이 초당 약 7장까지 가능하며 유효 화소수 12.3메가 픽셀의 니콘 DX포맷 CMOS 센서를 장착했다. 감도는 ISO 200부터 3,200까지 지원하며, 확장 시에는 ISO 100과 6400까지 증감이 가능하다. 고정밀 51 포인트의 오토 포커스 포인트를 채용했으며, 시야율 약 100%, 약 0.94배의 고배율 파인더를 장착하고 있다. 이외에도 CF카드와 SD메모리카드를 동시에 장착할 수 있으며, 셔터음을 감소시키는 '정숙 촬영 모드', 버튼 하나만으로 간단하게 촬영 모드를 바꿀 수 있는 '라이브 뷰' 기능을 제공한다.